Binciko na PCR nazarin matsala: Tambayoyi akai-akai da mafita

Polymores sarkar dauki (PCR) masu bincike suna da mahimmanci kayan aiki a cikin ilimin kwayoyin halitta, masu barin masu bincike su fadada DNA don yin amfani da DNA don yin amfani da DNA don yin amfani da DNA don bincika aikace-aikacen kwayoyin cuta zuwa binciken asibiti. Koyaya, kamar kowane irin na'urar hadaddun, mai bincike na PCR na iya gamsuwa da matsalolin da ke shafar aikinta. Wannan Labarin Adireshin Wasu Tambayoyi gama gariBinciken PCRShirya matsala da kuma samar da mafita mafita ga matsalolin gama gari.

1. Me yasa rashin aikin komputa na ba amplliless?

Daya daga cikin mafi yawan matsalolin da ake amfani da shi ta hanyar masu amfani shi ne rashin ƙarfin aikin PCR don fito da maƙasudin DNA. Ana iya danganta wannan ga dalilai da yawa:

Tsarin Primon da bai dace ba: Tabbatar da sitocinku na musamman don jerin maƙasudin kuma suna da zazzabi mai narkewar zazzabi (TM). Yi amfani da kayan aikin software don ƙira na lokaci don guje wa rashin daidaituwa.

Shiga isasshen samfuri DNA: Tabbatar da cewa kana amfani da isasshen adadin samfuri DNA. Yayi kadan zai haifar da rauni ko babu amplification.

Masu hana su a cikin samfurin: Centerants a cikin samfurin zai iya hana amsawar PCR. Yi la'akari da tsarkake dNA ko amfani da hanyar hakar.

Magani: Bincika ƙirar na farko, haɓaka maida hankali ne, kuma ka tabbata cewa samfurinka baya da masu hana su.

2. Me yasa samfurin kwamfutata na da ba daidai ba ne?

Idan girman samfurin PCR ba kamar yadda ake tsammani ba, yana iya nuna matsala tare da yanayin amsawa ko kayan abinci da aka yi amfani da su.

Babu takamaiman ingancin amplification: Wannan na iya faruwa idan an yi karo da kayan kwalliyar zuwa wurin ba wanda ba a kula ba. Duba takamaiman farashin mai amfani da kayan aiki kamar fashewar.

Ba daidai ba yanayin zafin jiki: Idan yawan zafin jiki ya yi ƙasa da ƙasa, takamaiman mai ɗaukar hoto na iya haifar. Ingancin zafin jiki na cututtukan ƙwayar cuta ta gradient.

Magani: Tabbatar da ingataccen bayani da ingantawa da zazzabi don inganta daidaiton samfuran PCR.

3. Nazarin PCR na nuna saƙon kuskure. Me yakamata in yi?

Rubutun kuskure akan mai bincike na PCR na iya zama da ban tsoro, amma ana iya samar da alamomi ga matsalolin da ke da kyau.

Batutuwa game da daidaito: Tabbatar cewa an bincika PCR na da aka tattara daidai. Binciken tabbatarwa na yau da kullun da masu binciken daidaituwa suna da mahimmanci don samun ingantaccen sakamako.

Kungiyar Software: Wasu lokuta, kwari na software na iya haifar da matsaloli. Sake kunna kwamfutarka kuma bincika sabunta software.

Magani: koma zuwa littafin mai amfani don takamaiman lambar kuskure kuma bi matakan magance matsala. Kulawa na yau da kullun na iya hana matsaloli da yawa.

4

Sakamakon binciken PCR na iya zama mai takaici yana iya takaici saboda dalilai da yawa:

Ingantaccen Real: Tabbatar da cewa duk reagents, ciki har da enzymes, buffers, da dntps, sabo ne da kuma inganci da inganci. Ya ƙare ko reagents na iya haifar da bambanci.

Zaɓin atler na atomatik: Saitunan zazzabi na iya haɗawa na iya shafar aiwatar da aikin PCR. A kai a kai duba sauyawa na athal na zafi.

Magani: Yi amfani da refents mai inganci kuma yakan yi amfani da satar yanayin zafin rana a kai a kai don tabbatar da sakamako.

5. Yadda za a inganta aikin PCR?

Inganta Ingantaccen halayen PCR na iya haifar da yawan amfanin ƙasa da mafi aminci.

Ingantaccen bayanin martaba: Gwaji ta amfani da taro daban-daban na firayim, samfuri DNA da MGCl2. Kowane aikin PCR na iya buƙatar yanayi na musamman don ingantaccen aiki.

Yi amfani da enzymes mai ƙarfi na: idan daidaito yana da mahimmanci, yi la'akari da amfani da babban-fiked DNE POlymase don rage kurakurai yayin amplification.

Magani: Yi gwajin ingantawa don nemo mafi kyawun yanayi don takamaiman saitin PCR ɗinku.

a takaice

Shirya matsala aBinciken PCRna iya zama aiki mai wahala, amma fahimtar matsalolin gama gari da mafita na iya haɓaka ƙwarewar PCR. Ta hanyar warware wadannan matsalolin gama gari, masu bincike na iya inganta sakamakon PCR kuma tabbatar da sakamako abin dogaro a aikace-aikacen ilmin kwayoyin halitta. Kulawa na yau da kullun, zaɓi mai hankali na reagents, da ingantawa da yanayin amsawa sune makullin don cin nasarar bincike na PCR.