Abubuwan da aka ambata a cikin halayen PCR

A lokacin da PCR ta dauki, wasu dalilai masu tsoma baki ana ci gaba da haɗuwa.
Saboda tsananin m na PCR, ana ganin gurbatawa ta zama daya daga cikin mahimman abubuwan da ke shafar sakamakon PCR kuma yana iya samar da sakamako mai kyau na karya.
Daidai mahimmancin hanyoyin da ke haifar da mummunan sakamako-bata-karya. Idan daya ko fiye sassan cakuda na cakuda ko amplifiation dauki kanta ana hana shi ko kuma ana iya hana shi, ana iya hana maganin assay. Wannan na iya haifar da haɓaka inganci har ma da sakamakon ƙarya.
Baya ga hanawa, asarar da mutuwar nucleic acid na iya faruwa saboda jigilar kaya da / ko yanayin ajiya kafin shirya samfurin. Musamman, babban yanayin zafi ko isasshen ajiya na iya haifar da lalata sel da makiyaya makiyaya. Tsarin tantanin halitta da nama da paraffin ya san sanannun abubuwan da ke haifar da fasahar DNA Formentation da kuma matsalar dagewa (duba adadi 1 da 2). A cikin waɗannan halayen, ko da mafi kyawun ware da tsarkakewa ba zai taimaka.

Hoto 1 | Sakamakon impobilization akan amincin DNA
Gel da Aikinose gel electrophoresis ya nuna cewa ingancin DNA ya ware daga sassan parfies ya girma da yawa. DNA na matsakaita daban-daban tsawo yana nan a cikin abubuwan da aka kawo dangane da hanyar gyarawa. An kiyaye DNA kawai lokacin da aka gyara a cikin samfuran Frezen ɗan ƙasa kuma a cikin tsari mai tsakaitaccen tsari. Yin amfani da m acidic bouin fiin fiin ko kuma wanda ba a san shi ba, tsari na acid-dauke da tsari ya haifar da babban rabo na DNA. Sauran juzu'i yana da yawa.
A gefen hagu, an bayyana tsawon digiri a cikin kilogobase nau'i (KBP)

Hoto na 2 | Asarar mutuwar makaman acid
(a) rata 3'-5 'a kan strands duka zai haifar da hutu a cikin manufa DNA. Hythesis na DNA har yanzu zai faru a kan ƙaramin yanki. Koyaya, idan wani shafin farko an rasa shi a kan guntun DNA, amplification na layi ne kawai ya faru. A cikin yanayin mafi kyawu, gutsutsar da ke iya tsayar da juna, amma yawan amfanin ƙasa zai zama ƙanana da ƙasashen ganowa a ƙasa.
(b) asarar tushe, galibi saboda farfadowa da samer thymidine, yana haifar da raguwa a yawan H-Boni da raguwar TM. A lokacin elenging dumama, firmers za su narke daga matrix dna kuma ba zai iya notal ko da karkashin yanayin magungunan ba.
(C) m tnmine sansanin da tt dimer.
Wata matsalar gama gari wacce yawancin lokuta yakan faru ne a cikin magungunan kwayoyin halitta ita ce kasa-ƙasa-mafi kyawun sakin nucleic acid idan aka kwatanta da hakar phoroform. A cikin matsanancin yanayi, ana iya haɗe da wannan da ƙidaya ƙarya. Lokaci mai yawa za a iya adana ta tafasasshen lysis ko narkewar ƙwayar cuta, amma wannan hanyar sau da yawa tana haifar da ɓoyayyen tunanin PCR.

Intiphions na aikin polymenle lokacin amplification

Gabaɗaya, ana amfani da hanawa azaman manufar akwati don bayyana duk abubuwan da ke haifar da sakamakon PCR. A cikin tsananin ilmin biochemical, hanawa yana iyakance ga ayyukan enzyme, watau, yana rage juyawa ko kuma yana rage juyi na DNA Polymase ko Cofactor mai aiki (misali, MG2 + don taq DNA Polymase).
Abubuwan da ke cikin samfurin ko buffers da kuma ruwan 'yan dauke da reagents kai tsaye, don haka ya jagoranci sakamakon polr.
Koyaya, hulɗa da yawa tsakanin abubuwan da suka dace da abubuwan da suka dace da makaman nucleic har ma ana tsara su azaman 'masu hana su. Da zarar an saki da amincin tantanin halitta da kuma makaman acid an saki, ma'amala tsakanin samfurin da mafita da ke kewaye da su na iya faruwa. Misali, 'Scavengers' na iya ɗaure shi guda ɗaya ko kuma tsoma baki sau biyu da kangin kai da tsarkakewa da keɓancewar da ke rage yawan masu hari da suka isa PCR.
Gabaɗaya, masu hana ruwa na kwakwalwa suna cikin yawancin ruwaye na jiki da kuma sake amfani da gwaje-gwaje na bincike (urea a cikin mahalli (phenols, ƙarfe masu nauyi)

Za a iya samun ƙarin provelent picr soprorors a cikin ƙwayoyin cuta da ƙwayoyin Eukar, waɗanda ba manufa ba, kayan aiki marasa izini, kayan aikin ɗakunan hannu kamar safofin hannu. Tsarkakewa na acid na nucleic a lokacin ko bayan hakar shine hanyar da aka fi so don cire masu hana amfani da PCR.
A yau, kayan hakar kayan aiki da kayan aiki da yawa na iya maye gurbin abubuwan da aka tsara da yawa, amma an dawo da 100% na 100% da / ko tsarkakewa da maƙasudin ba a taɓa cimma nasara ba. Za a iya yin musanyarorizai har yanzu a cikin acid din tsarkakakkiyar nucleic ko kuma an riga an sami sakamako. Dabarun daban suna wanzu don rage tasirin masu hana. Zabi na polymason da ya dace na iya samun tasiri mai tasiri akan aikin hana shi. Sauran hanyoyin da aka tabbatar don rage abubuwan hana cutar PCR suna karuwa na polr ko amfani da ƙari kamar BSA.
Ana iya nuna halayen halayen PCR na PCR na PCR (IPC).
Dole ne a kula sosai don cire duk reagents da sauran mafita a cikin kayan hakar, kamar ethanol, isopropann, sds, isopropann, sds, isopropann da phenol, daga ware ta da cikakken wanka sosai. Ya danganta da maida hankali ne, suna iya kunna ko inhiit.